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News如何選擇和使用 XBridge C18 色譜柱?
更新時間:2025-03-21 點擊次數:174次
XBridge C18 色譜柱是 Waters 公司推出的一款高性能反相色譜柱,廣泛應用于液相色譜(HPLC)和超高效液相色譜(UHPLC)分析中。它采用了第二代無機/有機雜化顆粒技術(BEH 技術),具有優異的化學穩定性和機械強度。
一、為什么選擇 XBridge C18 色譜柱?
1、寬 pH 范圍
XBridge C18 色譜柱能夠在 pH 1-12 的范圍內保持優異的化學穩定性。這意味著無論你分析的是酸性、中性還是堿性化合物,色譜柱都能穩定工作。例如,在高 pH 條件下,其穩定性比傳統硅膠基質色譜柱高出 10 倍以上。
2、低柱滲漏
該色譜柱具有極低的柱滲漏,特別適合高靈敏度的 LC-MS 聯用分析。低滲漏可以減少雜質離子對檢測信號的干擾,提高檢測的靈敏度和準確性。
3、優異的峰形
XBridge C18 色譜柱通過專有的三鍵鍵合和封端技術,顯著改善了堿性化合物的色譜峰形。這意味著在分析堿性藥物成分或生物分子時,你將獲得更對稱、無拖尾或前伸的色譜峰,從而提高定量分析的準確性。
4、高柱效
采用 BEH 顆粒技術,XBridge C18 色譜柱能夠提供高柱效。高柱效意味著更窄的色譜峰和更高的分辨率,特別適合快速分析和復雜樣品的分離。
5、長使用壽命
即使在苛刻的使用條件下,XBridge C18 色譜柱也能保持穩定的性能和較長的使用壽命。這意味著你可以減少更換色譜柱的頻率,降低實驗成本。
二、如何選擇合適的 XBridge C18 色譜柱?
1、粒徑選擇
XBridge C18 色譜柱提供多種粒徑選擇,包括 2.5µm、3.5µm和5µm:
(1)2.5µm:適用于超高效液相色譜(UHPLC),能夠提供更高的柱效和更快的分析速度,但需要更高的壓力。
(2)3.5µm:適用于常規 HPLC 和 UHPLC,平衡了柱效和壓力,適合大多數實驗室。
(3)5µm:適用于常規 HPLC,壓力較低,適合老舊設備或對柱效要求不高的應用。
2、柱尺寸選擇
色譜柱的內徑和長度也會影響分離效果:
(1)內徑:常見的內徑有2.1mm、3 mm和4.6mm。較小的內徑(如 2.1mm)適合微量分析和梯度洗脫,能夠減少溶劑消耗;較大的內徑(如 4.6 mm)適合常規分析和高通量檢測。
(2)長度:常見的長度有50mm、75mm、100mm、150mm和 250mm。較短的色譜柱(如50mm)適合快速分析,但分辨率較低;較長的色譜柱(如 250 mm)能夠提供更高的分辨率,但分析時間較長。
3、應用需求
根據你的具體應用需求選擇合適的色譜柱:
(1)生物醫學研究:如果分析蛋白質、肽或寡核苷酸,建議選擇 小粒徑(2.5µm或3.5µm)和較長的色譜柱(150 mm 或 250 mm),以獲得高分辨率和高靈敏度。
(2)藥物研發:對于藥物成分的分離和純化,可以選擇 3.5µm或 5µm的色譜柱,內徑根據樣品量和分析通量選擇。
(3)環境分析:如果檢測環境樣品中的復雜成分,建議選擇高柱效的 2.5µm或3.5µm色譜柱,以實現更好的分離效果。
(4)食品檢測:對于檢測食品中的添加劑或污染物,可以選擇常規的 5µm色譜柱,內徑根據樣品通量選擇。
三、XBridge C18 色譜柱的使用與維護
1、使用前準備
(1)平衡色譜柱:在使用前,使用適當的流動相平衡色譜柱,通常需要 10-20 個柱體積 的流動相。例如,對于一個150mm×4.6 mm的色譜柱,大約需要10mL的流動相。
(2)檢查系統:確保液相色譜系統沒有泄漏,泵和檢測器的性能良好。
2、使用注意事項
(1)避免惡劣條件:雖然 XBridge C18色譜柱具有寬 pH 范圍,但在特殊pH 條件下(如 pH < 1 或 pH > 12),仍需謹慎使用。
(2)控制流速:根據色譜柱的規格選擇合適的流速。例如,對于 4.6mm × 150mm 的色譜柱,建議流速為 1.0 mL/min。
(3)避免過壓:不要超過色譜柱的最大耐壓值。例如,對于5µm的色譜柱,最大耐壓為 400 bar。
3、維護與清潔
(1)定期沖洗:每次使用后,用適當的溶劑(如甲醇或乙腈)沖洗色譜柱,以去除殘留的樣品和雜質。
(2)避免反向沖洗:XBridge C18 色譜柱通常不建議反向沖洗,因為這可能會損壞篩板。
(3)存儲條件:將色譜柱存儲在 20% 甲醇水溶液 中,避免干燥。
四、常見問題解答
1、可以用于梯度洗脫嗎?
可以。XBridge C18適用于梯度洗脫,能夠提供良好的分離效果。在梯度洗脫過程中,建議使用小內徑(如2.1mm)的色譜柱,以減少溶劑消耗。
2、使用壽命一般是多久?
XBridge C18 色譜柱的使用壽命因使用條件和維護情況而異。在良好的維護下,色譜柱可以使用 數千次進樣。如果發現色譜峰變寬、拖尾或柱壓異常升高,可能需要更換色譜柱。
3、可以用于 LC-MS 聯用分析嗎?
可以。XBridge C18具有極低的柱滲漏,特別適合高靈敏度的 LC-MS 聯用分析。
XBridge C18 色譜柱憑借其優異的性能和廣泛的適用性,成為色譜分析領域中的可靠選擇。通過合理選擇粒徑和柱尺寸,以及正確使用和維護色譜柱,你將獲得更穩定、高效的分析結果。
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